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[推荐]生物安全实验室建设 教案       ★★★ 【字体:
生物安全实验室建设 教案
作者:翁景清    文章来源:浙江省疾病预防控制中心病毒研究所    点击数:    更新时间:2009-5-18    

第三章   生物安全二级实验室


 设备要求

主要用于各种病原微生物的实验检测与诊断等实验操作,在操作过程中所涉及的病原微生物会对实验人员及实验环境等构成一定的威胁,如果实验室检测设备、安全防护及个人防护装备不符合要求或配备不到位,就随时有可能造成实验室感染事件的发生。


实验室生物安全一方面要通过实验室设计上的分区隔离和气流组织等措施来保证,利用实验设备控制病原微生物外溢同样是确保实验室生物安全的主要措施之一。安全防护设备的安全防护原理是通过实验设备的物理屏障作用将病原微生物控制在一个较小的范围之内,并将其与实验人员有效隔离,来达到防止实验人员发生感染。

总之,是将具有感染性的病原微生物等生物感染因子的操作防在生物安全防护设备中操作,如感染性生物样本,污染的实验器材及废弃物使用生物安全柜或高压灭菌器等进行有效隔离和无害化处理等,保证实验室的生物安全。
生物安全实验室的设备配置主要有实验检测设备、生物安全防护设备和个人防护设备三大类,现简要分述如下。

一、检测设备要求

检测设备的配备应根据实验室开展的工作项目类型来定,一般分为病原学检测实验室、血清学实验室和分子生物学实验室几种,其主要设备配置有所不同。不管那种类型的实验室均应配备基本的设备才能满足检测工作的需要,上述三种类型的实验室的设备基本配置要求如下。

一)病原学实验室
基本配置设备
1、超低温冰箱(-60℃-80℃)
2、台式高冷冻速离心机
3、孵箱或二氧化碳培养箱
4、倒置显微镜和明视野显微镜
5、普通冰箱
6、水浴恒温箱
7、震荡器
8、涡旋器
9、低速离心机
10、移液器
11、酶标读数仪
12、酶标洗板机
13、净化工作台

其它必要时需要配置的仪器设备
1、移液器和电动吸液器
2、超声波发生仪
3、真空冷冻干燥仪
4、解剖镜
5、冷冻切片机冷柜
6、荧光显微镜
7、生化培养箱
8、微生物检定仪
9、病毒载量仪
10、流式细胞检测仪
11、显微成像系统
12、共聚焦显微镜
13、厌氧培养箱

二)、血清学检测设备
基本配置设备
1、冷柜(-30℃)
2、震荡器
3、涡旋器
4、低速离心机
5、移液器
6、酶标读数仪
7、酶标洗板机
8、水浴恒温箱
9、孵箱
5、普通冰箱

HEPA Filter

有条件可配备的设备
1、生化检定仪
2、化学发光仪
3、全自动免疫分析仪等


三)、分子生物学检测设备
基本配置设备
1、核酸扩增仪(PCR仪)
2、电泳仪
3、台式高速冷冻离心机
4、普通冰箱
5、震荡器
6、涡旋器
7、水浴恒温箱
8、低温冰箱(-40℃)
9、移液器
10、电动吸液器
11、净化工作台

有条件可配备的设备
1、DNA序列测定仪
2、杂交炉
3、恒温摇床
4、制备型电泳仪
5、蛋白纯化系统
6、脉冲场电泳仪
7、电泳成像系统
8、DNA电转仪
9、显微接种仪

二、生物安全防护设备
实验室主要安全防护设备包括:生物安全柜、高压灭菌器、负压通风柜及消毒喷雾装置及相关的个人防护装备等。

1、生物安全柜
根据其正面气流速度,送、排风方式,将生物安全柜分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级三个类型。可根据各实验室涉及的病原微生物的危害程度及实验室的级别进行选型,有关生物安全柜的原理特点及选型、维护等另行介绍。

2、高压灭菌器
高压灭菌器是实验室有毒有害污染废弃物无害化处理的主要设备,也是防止实验室废弃物中感染性物质外泄的关键设备。也是BSL-2实验室必配的安全设备。用于实验室废弃污染物消毒灭菌处理的高压灭菌器,建议采用蒸汽内循环的自动高压灭菌器,由于传统的排蒸汽式高压灭菌器在高压过程中需要向外排放冷空气,在排气时废弃物中的病原微生物会随冷空气一同排出,极易污染灭菌环境,导致感染事件,存在安全隐患。


高压灭菌器应选用品质优良,性能稳定,安全可靠的品牌,同时应定期进行校准和检测,确保高压灭菌器处于正常运行状态,保证实验室安全。

3、负压通风柜(罩)
负压通风柜(罩)主要功能是防止感染性检材在离心或开放性操作过程中感染性因子外溢导致环境污染或侵害实验人员。也是一种有效的物理抑制设备,要求在负压罩排风口要求安装高效过滤器,以捕获感染性物质,防止病原性感染因子外泄。

4、消毒喷雾装置
生物安全实验室消毒专用设备,主要使用甲醛、过氧化氢及过氧乙酸、环氧乙烷等消毒剂的喷雾消毒。其消毒效果要比紫外线消毒和手工擦洗消毒更好更彻底,还可减轻实验人员的劳动强度。实验室可根据条件及需要进行选配。

5、其它生物安全设备
除了上述生物安全防护设备外,在选购离心机、冷冻干燥器等实验设备时,也应尽量选择一些具有生物安全防护功能的设备或型号。如离心机可选配具有生物密封型转头或有负压过滤(高效过滤器)装置的机型,还有选择无火焰消毒灭菌灯(接种环或镊子等高温消毒)器材,以减少实验室污染的可能性。

6、洗眼器及喷淋装置
在实验室出口处应设置洗眼装置,必要时宜设置紧急喷淋装置,用于发生感染性材料溅入眼内或感染性物质污染实验人员外表时的应急处理。

固定式洗眼装置
固定式洗眼装置

便携式洗眼装置
便携式洗眼装置

7、个人防护装备
主要用于实验室操作人员的个体防护,主要有手套、口罩、帽子、防护服、防护眼罩、高筒胶靴及防护面罩等。具体要求将在个人防护章节中阐述。

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